反相C18 填料装填
2016-02-23 17:58:56 来源：北京安捷飞科技
不论填充材料的颗粒大小，一般采用湿法装柱。然而，当填料是广泛应用在理论分析中的5μm颗粒时，只有用高压湿法装柱才能达到理论段数的*大性能。此外，这样还可以阻止填装材料的电荷。
湿装法有两种：匀浆法和非匀浆法。通常使用匀浆法，它的填料比率与混悬洗脱剂密切相关。就洗脱剂来说，采用含氯有机溶剂，例如氯仿。
我们将介绍一种常用的匀浆法，用ODS（粒子尺寸5μm）装色谱柱（长150，内径4.6mm）的填充方法。
预备项目：
1、填料：ODS（十八烷基硅烷键合相）硅胶填料，粒子尺寸5μm。
2、色谱柱：色谱柱长150mm，内径4.6 mm。
3、填充泵：泵是装柱所必须的，但也可用具有装柱功能的液相色谱中可耐受升压至40MPa的泵.
4、填充机：体积20-320ML。
5、超声波清洗机
6、混悬洗脱剂和压入洗脱剂
7、色谱柱填充系统：请参见传真。它是用30ML填充机填充色谱柱（长150，内径4.6mm）示例。
下面的填充步骤是压力控制填充方法：
1、称取1.5-1.7g填料倒入烧杯中，加入10ml四氢呋喃和20ml氯仿，超声波分散15分钟。注意这步骤按比例放大制成浆状液。请注意装填前必须使填料成悬浮液使之浆状化，由于C18的表面是非极性基团，低的表面能可以使用极性较弱的悬浮液体。
2、设置一个预先与色谱柱连好的填充机（不需特别用压入洗脱剂充满色谱柱）50u不需要填充机可以直接装填。
3、旋转流动泵于填充模式（控制*大压力为40MPa），用备好的80%甲醇水溶液冲洗；
4、将用超声波完全分散的混悬液灌入填充机（倘若填充有裂缝，加入80%甲醇的压入洗脱液）；
5、紧紧盖住填充机的盖，打开流动泵，保持压力至流出液达100ML，
6、泵停止后，确定压力为0，从填充机取下色谱柱；
7、评估柱效，如理论段数。请用预标好柱效的色谱柱。（对将使用的色谱柱需设定效率标准和评估方法。）
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